Hlavničková M, Kuchař M, Osička R, Vaňková L, Petroková H, Malý M, Černý J, Arenberger P, Malý P
РЕЗЮМЕ
Интерлейкин 17 (IL-17) и его родственный рецептор A (IL-17RA) играют решающую роль в опосредованном клетками Th17 провоспалительном пути и патогенезе нескольких аутоиммунных расстройств, включая псориаз. IL-17 в основном продуцируется активированными Th-17 клетками-помощниками при стимуляции IL-23 и через связывание с его рецепторами опосредует клеточную сигнализацию IL-17 в кератиноцитах. Гиперпролиферация кератиноцитов относится к основным клиническим проявлениям псориаза. Чтобы модулировать опосредованный IL-17 воспалительный каскад, мы создали уникальную коллекцию связывающих белок IL-17RA-белков, которые препятствуют связыванию человеческого цитокина IL-17A с его рецептором на клеточной поверхности. С этой целью мы использовали очень сложную комбинаторную библиотеку, полученную из лесов альбуминсвязывающего домена (ABD) стрептококкового белка G и выбор дисплея рибосом, с получением коллекции высокоаффинных лигандов ABD человека IL-17RA, называемых связующими ARS. Из 67 проанализированных вариантов АБД было идентифицировано 7 различных семейств последовательностей. Представители этих групп конкурировали с человеческим IL-17A за связывание с рекомбинантным рецептором IL-17RA, а также с химерой IL-17RA-Immunoglobulin G, как было проверено в иммуноферментном анализе с ферментным связыванием (ELISA). Пять вариантов ARS связывались с IL-17RA-экспрессирующими клетками THP-1 и блокировали связывание цитокина человека IL-17 с поверхностью клетки, как было проверено проточной цитометрией. Три варианта демонстрировали высокоаффинное связывание с наномолярным значением Kd клеткам HaCaT кератиноцитов человека, как измерено с использованием линии лиганда Tracer Green. При стимуляции IL-17 активацией варианты ARS ингибировали секрецию Gro-α (CXCL1) нормальными фибробластами кожи человека in vitro. Таким образом, мы идентифицировали новый класс ингибирующих лигандов, которые могут служить иммуносупрессивными антагонистами белка, не содержащего IgG-IL-17RA.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА:
Рецептор IL-17; альбуминсвязывающий домен; связывающий белок; комбинаторная библиотека; цитокин
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30304852